V posledný deň na začiatok
V posledný deň môjho pobytu v laboratóriu som sa dostala k pomyselnému začiatku celého výskumu tohto tímu. Nemá príliš prívetivé meno, ale o to bol dôležitejší pre výsledky, ktoré sa tam dosiahli. Žabací extrakt. Presnejšie extrakt zo žabacích vajíčok.
Tento extrakt je vlastne čistá cytoplazma (obsah bunky bez jej organel) týchto buniek a obsahuje zmes nespočet proteínov, z ktorých sa veľa podieľa práve na formovaní filopódií. Použili ho aj v asi najdôležitejšom experimente tohto laboratória kedy ho a pár iných proteínov pridali k jednoduchej membráne a pozorovali okamžitý rast štruktúr, ktoré dokonalo imitujú filopódie. Teda je to veľmi používaná látka v labboratóriu a z času na čas treba doplniž zásoby.
So žabacími vajíčkami sme sa už stretli ale vždy sme ich oplodnili aby sme dostali malé embryá. Tentokrát to nepotrebujeme. Čo ale potrebujeme je veľa vajíčok, asi tak 20x viac ako sme používali predtým. Všetky vajíčka treba "odželatínovať" - oddeliť od nich ich obal. Oproti nádobrám,ktoré sme na to používali skôr mi tieto pripadali ako vedrá.
Neskôr k nim pridáme zopár chemikálí, ktoré extrakt udržia čerstvý a rozdelíme ich do skúmaviek. Skúmavky sme centrifugovali a získali sme veľmi zaujímavý výzor skúmavky - je rozdelená do troch vrstiev - na samom vrchu je toxicky žltá vrstva všetkých tukov, ktoré sa v bunkách nachádzali, pod ňou priehľadná cytoplazma - náš extrakt. Spodná vrstva sú pevné časti bunky, hlavne rozličné organely. Ako sa teda dostať k strednej vrstve v skúmavke bez toho aby sme ju kontaminovali inou vrstvou? Aj tu si vedci poradili sedliackym rozumom - vybrali skúmavky z tenkého plastu, ktoré prepichneme injekčnou striekačkou a strednú vrstvu vytiahneme zo skúmavky. Len sa pri tom nepoškrabať a nedostať trochu žabacích lipidov do krvného obehu.
Výslednú tekutinu už čaká iba veľmi dlhý proces filtrovania v centrifúge - do filtračnej skúmavky sa naleje extrakt - stočí sa na centrifúge a doleje sa do nej viac a zas,... Tento proces som nechala na veľmi trpezlivých vedcov a rozlúčila som sa zo všetkými úžasnými ľuďmi, ktorých som v laboratóriu spoznala, zbalila som si svoje vedecké články a laboratórny plášť a bohužiaľ, musela som odísť. Ale odchádzala som plná toľko vedomostí a skúseností, koľko som určite nečakala :).
Tento extrakt je vlastne čistá cytoplazma (obsah bunky bez jej organel) týchto buniek a obsahuje zmes nespočet proteínov, z ktorých sa veľa podieľa práve na formovaní filopódií. Použili ho aj v asi najdôležitejšom experimente tohto laboratória kedy ho a pár iných proteínov pridali k jednoduchej membráne a pozorovali okamžitý rast štruktúr, ktoré dokonalo imitujú filopódie. Teda je to veľmi používaná látka v labboratóriu a z času na čas treba doplniž zásoby.
So žabacími vajíčkami sme sa už stretli ale vždy sme ich oplodnili aby sme dostali malé embryá. Tentokrát to nepotrebujeme. Čo ale potrebujeme je veľa vajíčok, asi tak 20x viac ako sme používali predtým. Všetky vajíčka treba "odželatínovať" - oddeliť od nich ich obal. Oproti nádobrám,ktoré sme na to používali skôr mi tieto pripadali ako vedrá.
Neskôr k nim pridáme zopár chemikálí, ktoré extrakt udržia čerstvý a rozdelíme ich do skúmaviek. Skúmavky sme centrifugovali a získali sme veľmi zaujímavý výzor skúmavky - je rozdelená do troch vrstiev - na samom vrchu je toxicky žltá vrstva všetkých tukov, ktoré sa v bunkách nachádzali, pod ňou priehľadná cytoplazma - náš extrakt. Spodná vrstva sú pevné časti bunky, hlavne rozličné organely. Ako sa teda dostať k strednej vrstve v skúmavke bez toho aby sme ju kontaminovali inou vrstvou? Aj tu si vedci poradili sedliackym rozumom - vybrali skúmavky z tenkého plastu, ktoré prepichneme injekčnou striekačkou a strednú vrstvu vytiahneme zo skúmavky. Len sa pri tom nepoškrabať a nedostať trochu žabacích lipidov do krvného obehu.
Výslednú tekutinu už čaká iba veľmi dlhý proces filtrovania v centrifúge - do filtračnej skúmavky sa naleje extrakt - stočí sa na centrifúge a doleje sa do nej viac a zas,... Tento proces som nechala na veľmi trpezlivých vedcov a rozlúčila som sa zo všetkými úžasnými ľuďmi, ktorých som v laboratóriu spoznala, zbalila som si svoje vedecké články a laboratórny plášť a bohužiaľ, musela som odísť. Ale odchádzala som plná toľko vedomostí a skúseností, koľko som určite nečakala :).
Komentáre
Zverejnenie komentára